【产品ID号】:79412
【产品编号】:CL0167
【产品规格】:T25瓶
【中文名称】:人包皮成纤维细胞human foreskin fibroblasts
【英文名称】:HFF-1
【CAS 编号】:
【详细描述】:
贴壁 来源:人源 组织来源:皮肤; 包皮 细胞种属:人源 形态特征:成纤维细胞 生长特性:贴壁 培养基:Dulbecco's Modified Eagle's传代方法:推荐使用1:5到1:7的分流比 培养条件:该培养基配制成在空气中使用5%CO2。 (标准DMEM配方含有3.7 g / L碳酸氢钠,然后推荐在空气中加入10%CO2)。 继代培养 程序: 为确保最高的生存能力,在使用细胞之前,请务必将培养基和胰蛋白酶/ EDTA温热至37oC。 细胞在融合时应该分裂。推荐使用1:5到1:7的分流比。本协议中使用的体积为225 cm2(T225);按比例减少或增加用于其他大小培养瓶的解离培养基的量。 取出并丢弃培养基。 用1X PBS(SCRR-2201)溶液简单冲洗细胞层以去除含有胰蛋白酶抑制剂的所有痕量血清。 加入5mL胰蛋白酶-EDTA(0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53mMEDTA溶液,ATCC#30-2101)溶液至烧瓶并温育1分钟,轻轻敲打烧瓶,在倒置显微镜下观察细胞直至细胞脱离(通常在1到2分钟内)。 加入6.0至8.0毫升完全生长培养基并冲洗烧瓶表面以分离所有细胞。轻轻地上下移液会破坏细胞团块。 将所有细胞转移到离心瓶或管中并以270xg离心5分钟。 取出并丢弃上清液 添加10毫升完整的生长培养基细胞沉淀,并与10毫升吸管轻轻悬浮细胞(创建一个单细胞悬液)。 根据需要将更多的完全生长培养基添加到细胞悬液中以在约5x10 6 / T225烧瓶中培养细胞。 将烧瓶置于37°C的培养箱中,空气中含5%CO2。 细胞描述:该细胞系由ATCC于2003年由两名个体汇集的正常人类包皮建立。 临床数据 男 注释 这些细胞的生长应该在用作饲养层之前被捕获。 ATCC已成功照射(SCRC-1041.1)并用丝裂霉素C(SCRC-1041.2)处理细胞以用作饲养层。 如果HFFs被用作ES细胞的饲养层,那么不推荐使用它们过去的通道编号。 50(P50)。 建议饲养细胞在使用前24小时以5×10 4细胞/ cm 2铺板以获得用于干细胞生长的支持性单层。
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