产品ID号：52217
产品编号：CL0167
产品规格：T25瓶
中文名称：人包皮成纤维细胞human foreskin fibroblasts
英文名称：HFF-1
CAS编号：
产品分类：微生物->微生物
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贴壁 来源：人源 组织来源：皮肤; 包皮 细胞种属：人源 形态特征：成纤维细胞 生长特性：贴壁 培养基：Dulbecco's Modified Eagle's传代方法：推荐使用1：5到1：7的分流比 培养条件：该培养基配制成在空气中使用5％CO2。 （标准DMEM配方含有3.7 g / L碳酸氢钠，然后推荐在空气中加入10％CO2）。
继代培养
程序：
为确保最高的生存能力，在使用细胞之前，请务必将培养基和胰蛋白酶/ EDTA温热至37oC。
细胞在融合时应该分裂。推荐使用1：5到1：7的分流比。本协议中使用的体积为225 cm2（T225）;按比例减少或增加用于其他大小培养瓶的解离培养基的量。
取出并丢弃培养基。
用1X PBS（SCRR-2201）溶液简单冲洗细胞层以去除含有胰蛋白酶抑制剂的所有痕量血清。
加入5mL胰蛋白酶-EDTA（0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53mMEDTA溶液，ATCC＃30-2101）溶液至烧瓶并温育1分钟，轻轻敲打烧瓶，在倒置显微镜下观察细胞直至细胞脱离（通常在1到2分钟内）。
加入6.0至8.0毫升完全生长培养基并冲洗烧瓶表面以分离所有细胞。轻轻地上下移液会破坏细胞团块。
将所有细胞转移到离心瓶或管中并以270xg离心5分钟。
取出并丢弃上清液
添加10毫升完整的生长培养基细胞沉淀，并与10毫升吸管轻轻悬浮细胞（创建一个单细胞悬液）。
根据需要将更多的完全生长培养基添加到细胞悬液中以在约5x10 6 / T225烧瓶中培养细胞。
将烧瓶置于37°C的培养箱中，空气中含5％CO2。 细胞描述：该细胞系由ATCC于2003年由两名个体汇集的正常人类包皮建立。
临床数据
男
注释
这些细胞的生长应该在用作饲养层之前被捕获。 ATCC已成功照射（SCRC-1041.1）并用丝裂霉素C（SCRC-1041.2）处理细胞以用作饲养层。 如果HFFs被用作ES细胞的饲养层，那么不推荐使用它们过去的通道编号。 50（P50）。 建议饲养细胞在使用前24小时以5×10 4细胞/ cm 2铺板以获得用于干细胞生长的支持性单层。 